组织培养的培养技术

2010/12/15 20:08:40

1、取材植物体的各个部位皆可培表，但根据需要培养的难易，对不同植物则有所区别。茎尖是利用最多的部位。根据不同的需要还可取叶片、花、花梗或花梗腋芽、根、茎等。通常应改初生幼嫩的材料，其分生能力强。
2、消毒
组织培养用的材料大多取自田间，带有大量杂菌，这是无菌培养的大障碍，为此，需严治地进行消毒灭菌。取材后先将泥土洗净，再在自来水中冲洗10～2O分钟，然后转入无菌条件进行消毒。
3、接种培养
接种的培养材料在消毒滤纸上切成所需大小，通常约几毫米大小，中国兰花茎尖应在0.2毫米以下，为此，需在解剖镜下操作。工具用完即应在95%洒精中沾一下，然后用火焰消毒法消毒，避免工具带菌造成交叉污染。材料接种后将培养瓶移入培养室，放在培养架上进行培养。
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│组织│消毒顺序│备注│
│├──────────┬─────────┬────────┤│
││消毒前│消毒│消毒后││
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│种子│纯酒精中浸10分│10％次氯酸钙浸│九菌水洗3次，在│用幼根或幼芽│
││钟，再用无菌水漂│20～30分钟，再用│无菌水中发芽。或│来产生愈伤组│
││洗│1％溴水浸5分钟│用无菌水洗5次。│织│
││││在滤纸上发芽││
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│果实│饨酒精迅速漂洗│2％次氯酸钠浸10│无菌水反复冲洗，│获得无菌苗│
│││分钟│再剖除种子或内部││
││││组织││
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│茎切段│自来水洗净，再用│2％次氯酸钠浸15│无菌水洗3次│直立在琼脂培│
││沌酒精漂洗│一30分钟││养基上或切取│
│││││出组织进行培│
│││││养│
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│贮藏器官│自来水洗净│2％次氯酸钠浸20│无菌水洗3次、滤│从消毒材料向│
│││～30分钟│纸吸干│都取出组织来│
│││││培养│
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│叶片│自来水洗净，吸干，│0.1％氯比汞浸1│无菌水反复冲洗，│选用嫩叶，叶│
││再用纯酒精漂洗│分钟或2％次氯酸│滤纸吸干│片平放在琼脂│
│││钠浸15一20分钟││上，或叶片插│
│││││在琼脂中│
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(王怀宇)

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