春兰的茎顶培养和艺叶的发现

2010/12/15 20:08:40

春兰，自古以来，以其优雅之香、优美之叶和分布广泛，一直倍受人们推崇，并成为东洋兰系的代表种。现代，又因艺叶和奇花的发现，引起了人们极大的兴趣。但是，和其它东洋兰一样，因其自然分蘖繁殖速度极为缓慢，使得许多兰花爱好者难以拥有自己所喜爱的品种。
现在，这个问题通过组织培养已能得到解决。在春兰为代表的东洋兰组培中，一般要经过这样几个阶段：1．地下茎的形成。2．地下茎的增殖。3．从地下茎形成具有叶。根和假鳞茎的完整组培苗。因此，其总的培养过程较之卡特兰等西洋兰有很大的差异，而且培养的时间要长得多。
下面就介绍组织培养的基本过程。
组织培养的方法
1．材料。
采用茎顶培养的材料一般选取健壮无病株的一年生植株，在腋芽膨大的三、四月间采取。
2．杀菌和采芽。
将假鳞茎在叶的基部2－知cn处切去根、剥去时。在自来水中充分冲洗后，在5％的重氯酸钠或亚酸钙中消毒10分钟，移人无菌操作台内，用灭菌水冲洗三次，然后用滤纸吸去水分，置人表面皿中。
采取腋芽茎顶时，将假鳞茎以腋芽相对一倒，用2枚大头针固定在橡胶栓上，后在实验显微镜下，将腋芽鳞片、叶片依次用解剖刀剥去，切取腋芽项端1－2mm长度的组织。腋芽切取一般以假鳞茎下部腋芽为佳。
运用尚未展叶的假鳞茎，切取其茎顶组织，其操作方法与切取腋芽组织类似，只是在橡胶栓上固定的角度稍有不同。用些材料培养，其地下茎的形成要较腋芽为材料的要低。
3．培养基
一般使用添加NAAIPPM、KTO．lppm的Ms培养基，但因春兰不同品种对培养基质反应不同，最适宜的培养基配方仍须在实践中探索。另外，春兰培养一般使用含有琼脂的固体培养基为宜。
4．着床
切取的茎顶应立即将其切断面与培养表面密着，而且用塞子将试管密封。因地下茎形成时间较长，因试管密封环节必须高度重视。
5．培养条件。
根据试验，在25℃条件下，黑暗状态比照明状态下地下茎的形成要高，且初期生长快。一般在茎顶着床3O—45日后能用肉眼观察到地下茎，但到完全形成却需3个月左右时间。
6．地下茎的增殖和继代。
在地一下茎长至约1cm长度时，应将其移植到微通气寒栓封日的增殖培养基中，在500-1000lux光条件下培养。为利于增殖，培养容器一段采用5O0ml的三角烧瓶，内注人150－200nl的培养基。培养基可选用添加NAAO．SPPmr的京都培养基。
7．假鳞茎的形成
从地下茎先端到假鳞茎形成约需一年时间，培养基一般采用添加1PPm的NAA、2PPm的BA的Ms培养基。至含3一5片叶，1－3条根的假鳞整形成后可切离移栽。
8．驯化。
从试管中移出的幼苗可移植到水苔、云母或其它春兰用土中。驯化一般采用两个阶段，第一阶段为开始的l－2个月，在驯化室中进行，其条件类似于培养室；第二阶段则是近于一般种植的兰室，但要求做到弱光、多湿、适温条件。
二、艺叶的发现。
根据部分实验室培养的结果，不同的艺叶品种经过组织后具有明显的差异，对于艺叶的代表种类覆轮、中透缟、虎斑来说，各具有这样的特点。
1．覆轮：在组织过程中能形成两种地下茎。绿色的地下茎能形成与亲本完全一样的植株；黄白色的地下茎则不能形成正常的植株，也难以产生正常的地下茎。
2．中透缟。不能形成含有亲本色艺的艺叶，组培苗全部是正常绿叶的植株。因此，中透缟在目前无法通过组培来繁殖。
3．虎斑。在培养过程中斑艺往往难以表现，这主要是光线不足的缘故。在植株移栽后，只要予以适当的条件，新萌发的假鳞茎能表现出与亲本完全一致的植株，其成功率约为3O％。

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