墨兰组织培养

2011/1/23 14:34:27

组织培养就是根据植物细胞具有的全能性、再生能力和分生能力．从兰株体上取下茎尖分生组织，接种到培养基上，在无菌条件下，利用玻璃容器进行培养，使其形成新植株的方法。此方法是快速繁殖和保存种质材料及培育无病毒苗的一种好方法，是现代最先进的繁殖方法。
　　一、组织培养的优越性
　　
　　1、能够保持母本的优良性状，使上一代的优良性状稳定地遗传下来。
　　
　　2、节约繁殖材料，采用一小部分茎尖、侧芽、幼叶尖、休眠芽或花序，就能繁殖出大量的中国兰花。
　　
　　3、快速。从优良的母本取一小块组织，在合适的条件下经过离体培养，一年之内就能繁殖出上万兰苗。例如，将墨兰初生茎的顶芽切割成2～3毫米，在一年内就能繁殖出上万甚至几十万株幼苗。
　　
　　4、节省土地。组织培养的材料是三角瓶或试管，可以充分利用空间。例如，一间30平方米的培养室就能摆放1万多个三角瓶，可繁殖几万株苗，且周转快，全年均可连续培养。
　　二、组织培养的设备设施
　　
　　组织培养的设备包括准备室、接种室和培养室。具体设备有晾干架、实验台、药品柜、冰箱、PH计、高压消毒锅、培养基分装器、烘箱、温箱、搅拌器、离心机、电炉、蒸馏器、天平、软木塞打孔器、温湿调节设备、日光灯、培养架、转床、培养箱、超净工作台、接种箱、摇床、烧杯、培养皿、三角瓶、量筒、滴管、移液管、针筒、定容瓶、镊子、试管、剪刀、解剖刀、接种针。
　　三、组织培养的操作方法
　　
　　1、植物材料的灭菌及切取
　　
　　从墨兰组织培养的外植体均取自分生组织，最常用的为茎尖。茎尖的切取应在无菌接种室的超净工作台上完成。选择生长旺盛的植株，剥去叶片，取下茎尖。先用无菌水清洗干净，除去残留的鞘、叶基等，再用70%～75%酒精浸泡10～30秒，取出后在5%～10%的漂白粉溶液中浸10～15分钟，再用无菌水冲洗干净，在实体显微镜下挑出茎尖生长点，立即接种到试管里的培养基上。
　　
　　2、培养基的配制
　　
　　用于组织培养的培养基与用于种子萌发的培养基基本上相似，但也不尽相同。下面介绍一种兰属植物适用的培养基，以供大家参考。
　　
　　培养基配方：花宝l号含量：3克，香蕉含量：30克，蛋白胨含量：2克，苹果含量：20克，甘氨酸含量：0.02克，蔗糖含量：25克，肌醇含量：0.1克，甘露醇含量：1克，卡基腺嘌呤含量：0.002克，琼脂含量：12克，腺嘌呤含量：0.002克，椰子水含量：50亳升，蒸馏水含量：加至1000毫升。
　　
　　3、培养原球体
　　
　　接种30～45天后．形成小而圆的原球体。将原球体一分成四，放到培养基上培养，30～60天后，又可长出原球体，按照上述方法重新培养，这样，在短时间可获取大量的原球体。
　　
　　4、旋转培养
　　
　　将原球体切割成组织，放入试管内的液体培养基中，立即放于旋转培养床上旋转培养。
　　
　　5、分化培养
　　
　　在旋转培养床上培养一段时间后，小块稍微长大，取出接种在分化培养基上，放于分化室中培养15天左右，逐渐长出芽和根，进一步形成兰花小植株。
　　
　　6、移植试管苗
　　当兰花苗长出3～4片叶．具3～4条根后，可进行移植。移植之前应打开瓶盖，使之逐渐适应新的环境，然后从试管中取出幼苗，用自来水轻轻冲洗，把附着在幼苗上的培养基等杂物冲洗干净，然后移植于培养土或蛭石等基质中，放在温室中培养。

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