大岩桐组培继代技术

2011/3/15 0:00:00

大岩桐传统繁殖方法为播种法、扦插法、分球法等。大岩桐种子极小，每克种子有2．5万粒至3万粒，寿命较短，仅两个月左右。播种繁殖对土壤条件要求高，操作精细，且易发生性状变异、品种退化现象；扦插法虽可保持原品种特性，但繁殖系数较低，不能适应大批量生产的需要；分球法形成的植株又多具有株形不整齐的缺点，生产上亦不常用。基于以上原因，我们从1998年开始尝试用组培法繁殖大岩桐，基本上找到了适合大岩桐诱导、分化和生根的培养基配方和培养条件。
　　材料与方法供试材料为候毛大岩桐。剪取成年植株的幼叶，用流水冲洗半小时，在超净工作台上进行消毒处理。首先将经过消毒处理的植株幼叶放入75％酒精中浸泡30秒钟，之后用0．1％的氯化汞溶液处理5分钟至8分钟，最后用无菌水冲洗4次备用。以MS为基本培养基，附加蔗糖30克／千克、琼脂6克／千克及不同种类和浓度的激素，在PH值为5．8、温度为18℃至20℃条件下进行诱导、分化、生根培养。
　　诱导和分化将消毒后的幼叶切成0．4平方厘米至0．5平方厘米的方形小块，接种到附加2毫克／千克的6－BA、0．2毫克／千克的NAA的MS培养基上（苄氨基嘌呤BA为一种利于长的细胞分裂素，荼乙酸NAA为一种促进生根的生长素）在25℃愈伤组织，40天后少数愈伤组织上可分化出幼芽。
　　继代培养将愈伤组织块上分化出的幼芽切下，转入继代培养基上，继代培养基附加1毫克／千克的6－BA、0．1毫克／千克的NAA，培养温度为25℃，每天在1000LX至2000LX光强下连续光照12小时。一周后幼芽发育，并在基部形成大量芽体，一般一个月可长满培养基面，一个月应转移一次。
　　生根培养将继代培养中苗高达2厘米，有3片至4片完整叶片的小植株，转移到生根培养基上，生根培养基为1／2MS，附加1毫克／千克的I－BA（IBA为一种生长素）。培养条件与继代培养一致，2周后有根长出，可炼苗移栽。
　　炼苗与移栽影响大岩桐的移栽成活率的关键是控制好温度和湿度，大岩桐要求生长在高温、潮湿及半阴环境，通风不宜过分，要保持较高的空气湿度。移栽前先闭瓶炼苗1周，洗净根上附着的培养基，栽入装有蛭石的营养钵中，蛭石用0．5％的KMnO4消毒。搭塑料小拱棚保湿，棚上架遮荫网，保持棚内温度20℃至25℃，两周后逐渐揭开塑料薄膜，一个月后可定植上盆，常规培养5月至6月即可开花。
　　大岩桐组培快繁技术，比传统的播种法、扦插法、分球法繁殖系数高，植株整齐一致，由于是无性繁殖，其性状没有明显的分离。能保持原品种特色和降低繁殖成本。但继代培养过程中发现，同样是在1毫克／千克的6－BA条件下，有部分试管苗发生玻璃化，失去分化能力，而低于1毫克／千克的6－BA，分化数量明显减少，6－BA的适宜浓度有待进一步探讨。

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