圆齿野鸦椿茎段的组织培养方法

2011/7/4 16:47:53

圆齿野鸦椿茎段的组织培养方法，其选取当年萌发饱满新芽、或带芽饱满的当年生茎段为外殖体，经过诱导培养，２０～２５天即可以萌发出生长健壮的新芽；再经过２０～３０天左右的扩增培养，１５～２０天左右诱导生根培养后即可成苗、移栽，移栽成活率可达９０％以上；成活后的长势良好、株形健壮挺拔，扩繁系数高。
圆齿野鸦椿茎段的组织培养方法特征是：
　　　　１）取材方法：选取当年萌发饱满新芽、或带芽饱满的当年生茎段，在距离带芽节点１－２厘米处剪取，去除多余的叶片和２／３叶柄；用洗衣粉漂洗干净后，用自来水滴冲３－５小时；
　　　　２）培养基：
　　　　培养基的配制：基本培养基为ＭＳ，Ａｇ，Ｓｕ，ｐＨ值为５．８，生长激素为ＢＡ、ＩＢＡ、ＫＴ、ＮＡＡ、ＩＡＡ、Ｚｕ，附加物为Ａｃ等；培养基的厚度一般为１ｃｍ左右；
　　　　诱导培养基→ＭＳ＋ＢＡ（２ｍｇ／Ｌ）＋ＮＡＡ（０．３ｍｇ／Ｌ）＋Ｓｕ（２０ｇ／Ｌ）＋Ａｇ（７ｇ／Ｌ）＋Ａｃ（２～２．５ｇ／Ｌ）
　　　　诱导培养基→ＭＳ＋Ｚｕ（２～５ｍｇ／Ｌ）＋ＩＡＡ（１ｍｇ／Ｌ）＋ＮＡＡ（０．３ｍｇ／Ｌ）＋Ｓｕ（３９ｇ／Ｌ）＋Ａｇ（０．７ｇ／Ｌ）
　　　　生根培养基→１／２ＭＳ＋ＩＢＡ（０．５ｍｇ／Ｌ）＋Ｓｕ（２０ｇ／Ｌ）＋Ａｇ（７ｇ／Ｌ）
　　　　３）材料消毒处理：先对材料进行适当的修剪，用洗衣粉清洗材料，再将材料放入干净的烧杯中用自来水冲洗３０分钟，把水沥干置超净工作台备用，用７５％的酒精盖过材料，摇荡，３－５秒钟后去除酒精，加入０．１％升汞（ＨｇＣｌ↓〔２〕）处理１２分钟，将汞液倒入废汞瓶，用无菌水冲洗材料２－３次后，倒去无菌水即可进行接种；
　　　　４）诱导培养：取生长健壮的新芽切割成约０．５～１．５ｃｍ的茎段，削除新芽、表皮以及残留的芽外壳，保留２／３新芽幼嫩叶柄以保护腋芽，分别接种在诱导培养基中；
　　　　５）培养条件：光照时间：１２～１６ｈ／ｄ光照强度：１５００－２０００１ｘ温度：２４℃±１℃　　　　６）增殖培养：将上述诱导培养、生长健壮的丛生芽切割开，分别接种在增殖培养基中；　
　　　７）诱导生根：将继代诱导培养出来的幼苗切取单株，带有２－３片叶子，株高１－２ｃｍ，转移至生根培养基中；
　　　　８）小苗移栽：当试管苗长至３～４ｃｍ高，叶子有５～７片，根有３～５条，长度约２～３ｃｍ时，就可进行移栽；先把要移栽的苗搬移到培养室外，炼苗３～５天，以增强试管苗对室外环境的适应能力；然后打开瓶盖锻炼２～３天，再从培养瓶中取出，洗去根部培养基，移入蛭石和腐殖土（１∶２）混合的基质中，小苗移栽后放入室温中，保湿遮阴。

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