摘 要:以蝴蝶兰试管苗为试材进行了继代及生根培养基的研究,介绍了试验材料与方法,对试验结果进行了分析,通过两次试验对比得出结论:在蝴蝶兰的继代培养中3号培养基MS+BA5mg/L+NAA0.5mg/L+活性炭1.5g/L是最适合的;在生根培养中4号培养基MS+NAA1mg/L+活性炭1.5g/L是最好的。
关键词:蝴蝶兰;继代培养;生根培养;培养基
蝴蝶兰(phalaenopsis)为兰科(Cymbidium)著名的盆栽观花植物。它清雅艳丽、花形如蝶、花期较长,具有很高的观赏价值,为热带兰中的珍品。
蝴蝶兰属单型茎的兰花,很少有侧芽萌发,靠自然无性繁殖,繁殖率极低,靠有性繁殖又因种子细小,不含为种子萌发提供营养的胚乳和其他组织,而且种子萌发还需要共生菌滋养,所以在自然条件下很难萌发。
近年来,随着人民物质文化生活的提高和东西方文化交流的加强,蝴蝶兰更受到人们的喜爱。只依靠传统的营养繁殖已经不能满足市场需求,而组织培养技术可以不受时间的限制进行周年生产,在不改变母本性的基础上还能去除病毒、真菌和细菌等病害,日益成为工厂化生产蝴蝶兰的主要手段。因此研究蝴蝶兰的组织培养及相关技术,对于我国花卉业的发展是非常有必要的。
在蝴蝶兰组织培养技术方面,国内外都有一定的研究。为了充分准备试验,笔者参考了国内外蝴蝶兰组织培养研究的现状,设计了这次试验,目的是研究MS培养基中不同浓度的激素(BA,NAA)对于不同品种的蝴蝶兰继代及生根培养的影响,最终找出一个最佳培养基。
1材料与方法
1.1材料
沈阳农业大学园林花卉实验室提供的无菌试管苗。
1.2材料准备
由于所提供的试管苗的数量有限,无法满足试验需要,所以在1月23日对现有的试管苗进行继代、扩繁。
1.2.1培养基的制备
经过40天的培养,无菌试管苗的数量已满足需要,准备进入正式试验阶段。为了方便比较、选择,第一次试验配制了3个继代培养基,每个配方中的激素比(BA/NAA)分别为100,50,10,并依次编号为1号、2号、3号;一个生根培养基编号为4号。各配方中均加入蔗糖30g/L、琼脂6.5g/L、活性炭1.5g/L,pH值为6.2。第二次试验也配制了3个继代培养基,每个配方中的激素比都是10,并且沿用第一次试验中的3号培养基,依次编号为5(3)号、6号、7号,一个生根培养基为8号,除8号培养基不加活性炭外,其他都和第一次试验一样。
首先,称取蔗糖30g、琼脂6.5g、活性炭1.5g各4份,通过计算量取每个配方所需药品,分别倒入编好号的广口瓶中。将蔗糖和琼脂各一份放入一大烧杯,加入700mL~800mL蒸馏水,开始加热并不停地搅拌,等到琼脂完全溶解,烧杯内再无其他杂物时,停止加热。稍后加入一份量好的母液和激素并用蒸馏水洗3~5次倒入大烧杯,然后用蒸馏水定容并搅动再用pH试纸调pH值为6.2,最后加入一份活性炭搅拌均匀,准备分装。其他培养基也如此配制,每瓶倒入1cm深的培养基后进行封口。现把两次试验所用培养基配方列举如下:
1号:MS+BA5mg/L+NAA0.05mg/L+活性炭1.5g/L;
2号:MS+BA5mg/L+NAA0.1mg/L+活性炭1.5g/L;
3(5)号:MS+BA5mg/L+NAA0.5mg/L+活性炭1.5g/L;
4号:MS+NAA0.1mg/L+活性炭1.5g/L;
6号:MS+BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L+活性炭1.5g/L;