彩色马蹄莲的组织培养

2012/5/11 10:32:36

国内外研究概况
彩色马蹄莲属天南星科马蹄莲属植物。包括黄花马蹄莲（Z.albomaculata）,红花马蹄莲（Z.rehmannii）以及近几年来国外出现的不少杂交园艺品种。其花型为肉穗花序，佛焰苞呈红、黄、粉红、橘红、橙黄、或黄红复色等，色彩艳丽。多数彩色马蹄莲的绿叶带有白色斑点或条纹，可作为配叶材料。彩色马蹄莲的叶片与花雅致大方，为重要新型切花，可制作花篮、花束或插瓶之用，也可作盆栽观赏，在国外市场上较为流行，更是今年国内市场上的新潮花卉。
彩色马蹄莲传统上采用分割块茎的繁殖方法，繁殖系数较低。关于组织培养的研究报道较少。吴丽芳等人对国外引进的10多个彩色马蹄莲品种进行了组培研究，在短期内生产出了大量的组培苗。经过1~2年的栽培，已培育成开花种球，种球种植后，植株长势强、开花整齐、产花量高，且花色均匀一致，保持了品种的原有特性。
有效的培养方法
1、培养基配方
诱导培养基：MS+BA1~2mg/L+NAA0.1mg/L
增殖培养基：MS+BA0.2~0.5mg/L+NAA0.2~0.5mg/L
生根培养基：MS+NAA0.3mg/L+IAA0.2mg/L
2、培养程序
取材在栽培地中选取开花良好的彩色马蹄莲植株，待花谢后挖取块状根茎，自然晾干后，用100mg/L的GA3进行30~60min的浸泡处理，促进芽眼萌发。待20天左右芽眼萌动后，将块茎用软毛刷刷洗干净，剥去芽表褐色皮层，挖取0.5cm2大小的生长芽或芽眼。灭菌将从种球上挑下的芽眼放入洗衣粉水中充分漂洗，然后在0.1%的升汞溶液中浸泡30~40min，切除四周少许组织，放入2%次氯酸钠溶液中浸泡15~20min，无菌水洗3次，以除去残留消毒液，接种于诱导培养基中。生长及分化芽眼30天左右便可在诱导培养基中萌发，并有部分丛生芽的分化，一般将芽对半切开，较不切的更易较早诱导出丛生芽及愈伤组织。继续培养60天后，在部分芽块基部可形成致密具绿色芽点的愈伤组织，并有大量不定芽长出，较大的不定芽可长到2CM左右高。生根培养继代及生长培养基中分化的幼苗长至3~5CM高时，转入生根培养基中，15天后即可生根，一般情况下幼苗的生根率可达96%以上。质量标准及调控技术
马蹄莲的组培苗要求植株长势良好，叶色绿，根系发育良好，苗高3~5CM，有3~5片发育正常的叶片。叶片发黄、细弱或无根苗在过渡阶段的死亡率相当高。
马蹄莲的无菌体系的建立比较难，同时接入的芽可能有一个休眠的过程，有时虽然芽已经接入瓶内，但生长非常缓慢，有一个停滞时期之后才会开始正常生长。特别是在采花后就直接采球进行组织培养时这种停滞生长现象特别明显。一般经过催芽处理后的种球生长会相对正常。所以适时采芽进种极为重要。
在加BA1mg/L+NAA0.1mg/L培养基中，马蹄莲组培苗既有丛生芽增殖，又有愈伤组织的产生，芽的分化及生长也较好。在加BA0.5mg/L+NAA0.55mg/L的培养基中，愈伤组织的分化较少，主要是丛生芽的增殖及芽的分化生长。因此，培养基加BA1mg/L+NAA0.1mg/L和BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L适于生根和繁殖同时进行，二者轮用效果更佳。在培养基加BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L中，基本无丛生芽及愈伤组织增殖，主要是丛生芽长高。将从BA0.2mg/L+NAA0.1mg/L或BA1mg/L+NAA0.1mg/L上诱导分化的丛状芽切成片状，直接转入加BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的培养基中进行培养，分化成苗，然后再进行生根培养，可获得大量的分生苗，且苗的长势良好。芽眼萌发的原生芽与愈伤组织分化的不定芽植株无明显差异。BA浓度高，利于愈伤组织的增殖，不利于芽的分化，随着BA浓度降低，并适当增加生长素浓度，可促进愈伤组织分化成苗及生根。
各个品种在组培时的增殖差异较大，要根据不同品种的长势进行激素的调整。在组培中马蹄莲的生长比较慢，培养瓶用不透气膜封口较透气膜更有利于苗的生长和分化。单株马蹄莲的生根培养基中培养60天以上，根系铺满瓶底，小苗叶片开始边黄，逐渐干枯，未见明显的块茎生成，说明彩色马蹄莲不像其他球茎花卉，可在培养瓶内形成块茎或小球茎。因此彩色马蹄莲只能栽种组培苗，一般彩色马蹄莲组培苗需在田间栽培3~4个月后小子球才开始形成。
出瓶苗的过渡移栽
将出瓶后的生根苗洗去琼脂放入低浓度多菌灵中消毒片刻，按5CM*5CM株行距，移栽于腐殖土：红土（10：1）或土质较好的沙壤土上，均可获得良好的生长效果。移栽1个月内，注意保水和遮荫。1个月后，幼苗开始迅速生长，此时可适当增加光照，并辅助喷施叶面肥。
幼苗移栽以春、夏季最好，此时幼苗成活率高，可达到90%左右，而且移栽的苗生长期长，到冬季休眠时已形成直径为2~3CM的小球茎。春夏季以后移栽成活率稍低，而且形成的球茎很小，有时甚至未形成小块茎即枯叶。但到第2年春，小苗一般都会萌发生长。
当苗休眠后挖出球茎，放与阴凉通风处储藏，翌年春季经300*10-6赤霉素浸泡处理10分钟，然后进行正常栽培，5~6月份少部分球茎便可开花。其他需再培养1年，即可长成直径5~8CM的开花球，用于优质彩色马蹄莲切花的生产。

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