北虫草的菌种配方?

2012/5/13 8:13:24

王老师:北虫草的菌种配方是什么?

姓名：陈立　单位：　联系电话：13596214762　2008-02-15

专家解答
陈立同志： 您好，北虫草的制种工艺流程操作如下： 一、精选原材料 1、母种培养基选料：琼脂要无杂质，银白色干燥的。马令薯无霉烂变质，去皮和挖去芽眼。葡萄糖是选用普通的；还要少量的蛋白胨；磷酸二氢钾，硫酸镁等。 2、原种培养基选料：蛋白胨、葡萄糖、磷酸二氢钾，硫酸镁只是普通的，蚕蛹粉不要霉变受潮的，要干燥新鲜的。 3、栽培原料：大米、蚕蛹粉要新鲜，干燥，无霉变，葡萄糖是普通的等。 二、工具器材种植北虫草需要玻璃试管、棉花、塑料箱、杀菌锅、摄子、天平、菌种瓶、接种箱，接种针、酒精棉花、消毒剂、培养室架、控温设备等。 三、北虫草母种制法及培养 （一）一级母种培养基配制方法洗净玻璃试管，称好各种原材料，先把马令薯洗净削皮去芽眼，然后切片，放在铝锅烧煮。按水的比例加20%切片后的马令薯，煮开后保温20分钟，再用6层纱布过滤，捏紧渣汁，去渣，再补足水份原等量。再把按各2%剪碎的琼脂，葡萄糖，蛋白胨，磷酸二氢钾、硫酸镁等微量元素按比例原料倒入锅内，文火溶解后再过滤。此时就可分装玻璃试管。每支试管装量1/5。擦净管口，塞好棉塞，再放在灭菌锅消毒。 当消毒锅固紧盖后立即加热升温至0.5公斤/公分2后。即放净冷气降压至0后，重新升温至1.2公斤/公分2，文火保温30分钟，然后开盖冷却至常温，乘热进行三分之二斜面面积。隔2天后，观察玻璃管的冷凝水回落在底面，观察平面仍很平坦和无杂菌丛生就可等待接种。 （二）一级母种的接种方法如果确定母种转管后接种的母种。先消毒接种箱，再消毒母种试管和其它器具。其方法是将所用的母种试管、接种工具全部放进接种箱内，关好箱的门窗，再将消毒气化剂立即放进箱内汽化，迅速关好门窗手筒窗，待气化后半小时就可准备接种。 接种的方法是先把母种外表、器皿具在点燃的酒精灯上消毒8-10秒钟时间，再把母种试管口对准酒精灯火焰，并把棉塞轻轻拉出。再用接种铲把菌种划成数段，然后用接种刀按数段的接种段片再划成米粒大少的菌种移植在新的试管斜面中间培养基上。最后把原来的棉塞在酒精灯上消毒3秒钟后迅速塞回试管口，这样就完成一支母种试管接种的工作任务，以后就按此方法顺序类推接种。 （三）北虫草母种发菌管理方法 当北虫草母种移植在PDA培养基上后，立即将接好的菌移送在23℃左右的温室里恒温培养。经过5-7天的适宜温度发菌，所接入的菌种开始萌发菌丝。并向斜面周边延伸生长。此时就检查所接入的菌种周围有否杂菌生长？一旦发现杂菌立即拣出去掉。到了12-15天后，虫草母种的菌丝在适宜的温度已经长到斜面试管2/3面积时，这时候室温降至22℃左右，目的是使菌丝缓慢生长，起到复壮的作用。到了20天以后，整个菌丝布满斜面，等3-5天后就可接北虫草原种了。 四、北虫草原种培养技术方法 当北虫草母种培养成功后，就可以培养北虫草原种，具体培养方法是： （一）培养基配方： ①玉米粉1%；②葡萄糖2%；③蛋白胨1%；④酵母粉0.5%；⑤磷酸二氢钾0.1%，水95.35%；⑥硫酸镁0.05%；⑦PH值调至6.5左右。 （二）培养方法 ①制作原种培养基：将这些原料溶于水后装在500毫升玻璃瓶中，每个玻璃瓶装量150毫升，然后用8层纱布做成盖盖住瓶口扎紧，立即放在高压灭菌锅内进行消毒，待压力表上升至0.5公斤/公分2压力时，即放净冷气的指针降至0后，再关掉放气阀门，待温度表指针逐渐上升至1.2公斤/公分2后就开始保温45分钟后，慢慢下降指针至0，然后开盖冷却至常温，再移入接种箱等待接种。 ②原种接种方法：先把已消毒好的北虫草液体原种培养基移放进接种箱内。并把北虫草母种和接种勾，酒精灯，消毒棉等接种物也放在接种箱内。此时就开始在接种箱内剪开气化消毒剂，立即关闭所有接种箱内门、窗、手筒口等处密闭消毒。待半小时后，接种人员就可把手伸进手筒口进行接种。接种的方法是，点燃酒精灯，左手拿着母种试管对准火焰口，右手拿着铁勾在酒精灯火焰消毒3-5秒种后立即伸进母种试管内把菌种分成5-7段，再用左手迅速将纱布瓶盖打开，右手即把一段菌块勾入瓶内速将瓶盖按原样盖紧。第二瓶接种的方法随第一瓶一样同。 当每箱的北虫草原种接好后，就迅速移入24-26℃恒温培养室里发菌培养。经过适宜的温度5-6天的发菌培养，栽培者要检查北虫草菌液的颜色为深棕色，瓶口闻有很浓的北虫草气味，就能辨别出菌种的优劣质量。如有发菌瓶内浓度低、气味臭，并有五颜六色的菌液，就是有杂菌污染的菌液，坚决不能用。如果用上去，待长出的不是北虫草，而是杂菌。 以上内容，仅供参考。

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