培养基是外植体分化、生长和发育的基质。目前应用的培养基配方有很多种。培养基的名称多以发表人的名字命名,再加上年号。如WH培养基.White (1943); MS培养基,Murashige和Skoog(1962); LS. Linsmaier和Skoog(1965); ER. Eriksson( 1965); H, Bourgin和Nitsch(1967);B5.Gamborg等(1968);Ns.北京植物研究所(1974);SH,Shenk和Hildebrandt( 1972); WS. Wolter和Skoog( 1966); HE, Heller( 1953); BL. Brown和Lawrence(1968)。对某个培养基的成分进行改良后,则称某某改良培养基。培养基的配方虽有几十种之多,但就其性质来看,除大部分是水外,多由下列五类物质组成。(你知道仙人球的养殖方法吗?)
1、无机营养物:根据含量分为大量元素和微量元素,大量元素包括氯、磷、钾、硫、钙、镁、钠、氯。微量元素包括碘、硼、锰、锌、铝、铜、钻、铁等。
2、碳源和能源:碳源的种类影响外擅体的生长及器官发生。最常用的碳源是双糖中的蔗糖,它还是一种能控制培养基渗透势的渗透剂。常用浓度为2-4%,也可用单糖中的葡萄糖,果糖代替。根据植物种类的不同,还可利用麦芽糖、乳糖、半乳糖,两种糖混用,有时比单独使用效果好。
3、维生素:培养基中所加的维生紊属于B族维生素类。大多数植物微体快速繁殖所必须的维生素是盐酸硫胺素(B1)。还有盐酸吡哆素(B6)醇、生物素、烟酸、甘氨酸、叶酸等。上述维生素都有促进分化和生长的作用。维生素c有防止组织变褐的作用。
4、生长调节物质:包括植物生长索、细胞分裂素及赤霉素三类。常用的人工合成的植物生长素有吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)、2.4-二氯苯氧乙酸(2·4-D)等。细胞分裂紊包括玉米素(ZT)、异戊烯腺嘌呤(2iP)、6-苄基嘌呤(6-BA或BAP)、激动紊(KT)6-呋喃氪基嘌呤等。其中以BAP作用最强.KT次之,故应用最多。赤霉素常用赤霉酸(GAa)。此外,脱落酸(ABA)这类生长调节物质对器官的发生也有一定影响。大多数木本植物都需要一定的生长素类与细胞分裂素的配合比例,其比值的高低彬响芽的分化及根的发生。
5、有机附加物:包括人工合成和天然复合物。人工合成有氨基酸与酰胺类,如甘氨酸、答氨酸、天门冬酰胺等。天然复合物有椰乳(CM)、酵母提取液(YE)、苹果,番茄的果汁、马铃薯液。
6、支持物:外植体在固体培养基上培养比在液体悬浮中培养,其形态发生及生长发育均更好。用作固体培养基的支持物,主要有琼脂(洋菜).它是从海藻中提取,在90C左右水中溶解.40C左右时液体凝固。琼脂除起支持作用外,还具有吸附能力,并能除去一些培养中产生的废物。但由于琼脂价格较贵,加上含有无机物,维生素及其它物质,会使研究代谢与营养复杂化。因此,人们致力于研究代用品。近来发展的有;带正电荷的葡聚糖微粒、淀粉的聚合物、蔗糖的聚合物、二氧化硅、玻璃小珠、玻璃纤维,滤纸等,但这屿代用品均来广泛使用。琼脂浓度影响形态发生、组织增殖及生长,通常为。0.5-1%
7其它:在培养基中有时还加活性炭、目的是除去琼脂中的毒物和组织所产生的废液;
防防止组织变棕色;刺激生根。