美国金钟连翘组培快繁技术的研究

2012/9/11 15:17:19


美国金钟连翘
美国金钟连翘为木犀科连翘属的半常绿灌木,是连翘和金钟花的杂交种,性状集中金钟和连翘优点,早春满枝金黄,艳丽可爱,生长期枝条拱形展开,尤以晚秋冬初翠绿欲滴,形成一道亮丽的风景线,近年来在园林中广为应用[1]。美国金钟连翘多以扦插法繁殖,存在繁殖率低、苗木质量差、不整齐等不利因素,极大地限制了这一优良品种在园林中的应用规模。利用组培快繁技术对美国金钟连翘进行快速繁殖,可在短期内生产出大量整齐、均匀的健壮植株,并有利于种质资源的保存、优良品种的应用与推广,以及为基因克隆和生产转基因植株做准备材料[2]。
  
  1材料与方法
  
  1.1材料
  供试材料为从南京中山植物园引种的美国金钟连翘。
  
  1.2方法
  1.2.1外植体的处理。选择生长健壮、洁净并且无病虫害、当年生长的植株。剪取带腋芽的茎段切成长1.5cm的切段,在流水下冲洗2~5h,用饱和漂白粉液浸泡25min,在超净工作台上用0.1%的HgCl2溶液浸泡5min,无菌水冲洗5次后接种。
  1.2.2增殖培养。在MS+NAA 0.1mg/L的培养基中,分别加入0mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.5mg/L的6-BA;在MS+6-BA 1.0mg/L的培养基中,加入0.1mg/L的NAA、IBA和IAA,观察试管苗的生长和增殖情况。培养基含蔗糖30 g/L、琼脂7g/L。每种培养基用于统计的样品为随机抽取15瓶,每瓶中只接1个外植体,增殖系数定义为每个外植体所产生新芽的个数。
  1.2.3生根培养。在1/2MS的培养基中,加入不同浓度的IBA、NAA和IAA,观察试管苗的生根情况。培养基含蔗糖15g/L、琼脂7g/L。每种培养基用于统计的样品为随机抽取20瓶,每瓶中只接1个丛生芽,统计生根率。
  1.2.4培养条件。培养温度25~28℃,光照11~12h/d,光强1 000~1 500Lx,培养基pH值5.9。
  
  2结果与讨论
  
  2.1增殖培养
  将带节茎切段接种到不同浓度的6-BA的MS+NAA 0.1mg/L 培养基上,培养至第九天时在多数培养基上外植体节上有侧芽萌动,培养至第十七天时在一些培养基上茎两端切口处形成愈伤组织,培养至第三十六天时大多数培养基上有芽生成,第四十五天时统计产生的新芽数量,计算增殖系数,结果如图1所示。由图1可知,随着6-BA浓度的增大,试管苗的增殖系数表现为先上升后下降的趋势。当6-BA浓度为1.0mg/L时,试管苗的增殖系数为6.3,显著高于其他各浓度处理。
  
  
  在MS+6-BA 1.0mg/L的培养基中,分别加入0.1mg/L的NAA、IBA和IAA,统计试管苗的增殖系数,其结果如图2所示。图2表明,相同浓度的NAA、IBA和IAA对试管苗的增殖系数的影响不尽相同。其中NAA为0.1mg/L时试管苗增殖系数最大,显著高于IBA和IAA。综合图1和图2可知,美国金钟连翘试管苗增殖的最适培养基应为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L。
  
  2.2生根培养
  将培养在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L的增殖苗切成单芽植株,接种到分别添加0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L、2.5mg/L的IBA、NAA和IAA的1/2MS培养基中,观察试管苗的生根情况,统计生根率,结果如图3所示。由图3可知,当激素浓度相同时,添加IAA显著有利于促进试管苗的生根;当IAA浓度为1.5mg/L,试管苗的生根系数最大,达98.7%。因此,最适合美国金钟连翘试管苗生根培养的培养基为1/2MS+IAA 1.5mg/L。
  
  2.3试管苗的移栽
  试管苗在瓶内生根后,在自然光照和温度20~25℃的条件下炼苗20d左右,当苗高7~10cm、有4~5条白色长根时,从瓶内取出洗净培养基,然后移栽到蛭石中,每天浇Horland营养液,并加塑料袋保湿,10d后成活率达84.3%。定植于腐殖土中并移入温室栽培,最终成活率可达91.2%。
  
  3参考文献
  [1] 虞敏,虞德源.美国金钟连翘[J].中国花卉园艺,2002(12):14-15.
  [2] 唐道城,梁顺祥.观赏植物组织培养研究进展[J].青海大学学报(自然科学版),2006(4):26-29.