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果树病害——水果生长期和贮藏期病害的识别与鉴定
一、目的要求 通过症状与病原观察，掌握常见果实病害的症状特点和果实主要病害的病原形态特征。
二、仪器用品 显微镜、幻灯机、投影机、计算机、载玻片、盖片、解剖刀、拨针、软化液、蒸馏水、擦镜纸等。
三、实习材料 水果贮藏期主要病害（苹果：轮纹病、锈果病、炭疽病、霉心病；梨：黑斑病、黑星病、轮纹病、褐腐病、青霉病；葡萄：炭疽病、黑痘病、白腐病；桃：炭疽病、褐腐病、红粉病；板栗：种仁斑点病）的症状标本、新鲜材料、切片、挂图、照片、幻灯片、多媒体课件等。
四、观察内容和方法
（一）苹果、梨轮纹病(physalospora piricola)
1. 症状 病斑圆形、褐色，呈颜色深浅交错的轮纹状，表面不凹陷，腐烂果肉可深达果心。后期从病斑中部开始逐渐产生小黑点，散生。严重时全果腐烂，最后失水成黑色僵果。观察果实症状标本或照片，注意症状特点及与炭疽病的区别。
2. 病原 梨生囊壳孢。属于子囊菌亚门囊壳孢属真菌。无性态为轮纹大茎点菌macrophoma kawatsukai。属于半知菌亚门大茎点霉属。
病斑上的小黑点即为病菌的分生孢子器，分生孢子器扁球形；分生孢子纺锤形，两端稍尖，无色、单胞。镜检病原无性态切片，掌握病原形态特点。
（二）苹果、梨、葡萄、桃炭疽病（colletotrichum gloeosporioides）
1. 症状 各种果实炭疽病症状有相同的特点，即病斑圆形或近圆形，表面凹陷，褐至红褐色，从内向外逐渐产生排成同心轮纹状的小黑点。潮湿时，小黑点上可溢出淡黄褐色至粉红色粘液；病果肉变褐、腐烂、具苦味。后期病果失水缩成为黑色僵果。在苹果、梨上，病斑纵切面均是漏斗形，并可直达果心；在葡萄某些品种上，病斑初为淡褐色至褐色放射状菌索型，表面不凹陷，后发展为圆形凹陷病斑；桃炭疽病果呈明显的同心环纹状皱缩，后全果软腐。观察症状标本或照片，注意病斑表面是否凹陷？小黑点是否呈轮纹状排列？并与轮纹病进行比较。
2. 病原 盘长孢状刺盘孢。属于半知菌亚门炭疽菌属真菌。
病部着生的小黑点为该菌的分生孢子盘，粉红色粘液为分生孢子和胶体物质的混合物。分生孢子盘枕状、无刚毛，盘内平行排列一层圆柱形的分生孢子梗。分生孢子梗无色、单胞，顶生无色、单胞、椭圆形的分生孢子。镜检病原切片，观察分生孢子盘、分生孢子梗及分生孢子的形态特征。
（三）苹果、梨、桃、杏褐腐病
1. 症状 主要危害果实，初期为褐色至黑褐色圆形或近圆形病斑，后期病斑扩展成不规则形甚至全果变褐或黑褐色；果肉腐烂，有特殊香味；后期腐烂病斑表面产生呈轮纹状排列、灰白色到灰褐色、豆粒大小的绒球状霉丛，有时霉丛密集成层。苹果褐腐病病果具韧性、有弹性；梨褐腐病病果初期无韧性、呈烂泥状，但后期略具韧性。观察症状标本或照片，注意腐烂病果颜色、霉丛颜色及排列方式。
2. 病原 苹果、梨褐腐病：仁果褐腐丛梗孢（monilia fructigena）；桃、杏褐腐病：果生丛梗孢（m.fructicola）和灰丛梗孢（m.cinerea）。属于半知菌亚门丛梗孢属真菌。
病果表面产生的线球状霉丛即为病菌的分生孢子梗与分生孢子。分生孢子梗短，有时有分枝，无色；分生孢子卵圆形至椭圆形、无色、单胞、串生，有时孢子链可以分枝。镜检病原切片，观察分生孢子梗与分生孢子的特点。
（四）梨黑星病（venturia pirina）
1. 症状 幼果受害，病斑黑色，表面生有浓密黑霉，病果往往不能长大，畸形，甚至龟裂，常早期脱落。果实膨大前期受害，病斑黑色凹陷，上生黑霉，随果实生长而呈畸形果。果实膨大后期至成熟期受害，病斑为圆形褪绿黄斑，较硬，凹陷或凹陷不明显。表面产生稀疏的黑色霉状物或没有霉状物，重病果畸形，味苦。在贮藏运输期间，病斑表面有时可产生浓密的灰色霉层。观察症状标本或照片，注意病斑颜色，是否凹陷及霉状物特点？
2. 病原 梨黑星霉。属于子囊菌亚门黑星菌属真菌。无性态为梨黑星孢fusicladium virescens ，属于半知菌亚门黑星孢属。
病部产生的褐色至灰黑色霉状物即为病菌的分生孢子梗与分生孢子。分生孢子梗丛生、短粗、简单、暗褐色、单胞，梗壁上有许多钝形齿状突起（孢子痕）；分生孢子顶生或侧生、淡褐色、单胞、（偶有双胞）、瓜籽形或纺锤形。从病原标本表面刮取霉状物制片镜检，观察分生孢子梗及分生孢子特点。观察病原有性切片，注意子囊形状、每个子囊内子囊孢子数目、子囊孢子排列方式及子囊孢子形状、细胞数目等特点。
（五）梨黑斑病（alternaia kikuchiana）
1. 症状 病斑黑色，圆形或近圆形，凹陷，表面产主稀疏的墨绿色到黑色霉状物。观察症状标本或照片、注意其症状特点。
2. 病原 菊池链格孢。属于半知菌亚门链格孢属真菌。
（六）苹果、梨、柑桔青霉烂果病（penicillium expansum、p.italicum etc.）
1. 症状 发生在贮藏运输期。病斑圆形或近圆形，呈局部性腐烂、表面淡灰绿色至淡褐色。常有凹陷；条件适宜时，全果迅速腐烂，果肉呈烂泥状，有特殊的霉味。随着病斑的扩展，从病斑表面中心开始逐渐产生霉丛或霉层，霉状物初为白色、渐变灰色、最后成为青绿色，有时霉状物可排列成轮纹状。腐烂病果失水干缩后常仅留一层果皮。观察症状标本或照片，注意病斑颜色，是否凹陷及霉状物特点。
2. 病原 常见的为扩展青霉和意大利青霉。属半知菌亚门青霉属真菌。
病果表面产生的霉状物即为病菌的分生孢子梗与分生孢子。分生孢子梗无色、呈帚形分枝，分枝顶端着生无色瓶状小梗，小梗上产生串状、球形、无色、单胞的分生孢子。 从病果表面或培养基上切取一小块带有霉状物的材料或培养基，置于载片上直接镜检，观察分生孢子的串生状态。然后从其表面紧贴组织或培养基刮取或挑取部分霉状物，置于载片一端，并加几滴自来水冲洗其大量的分生孢子，而后将带有少量分生孢子的分生孢子梗挑至载片另一端，制片镜检，观察分生孢子梗特点及分生孢子形态。
（七）苹果霉心病（alternaria sp. etc）
1. 症状 只在贮运期发生，主要特点是果肉从内向外逐渐腐烂。初期病果表面无异常，切开果实可见果心变褐坏死，并有白色或粉红色或青绿色或黑色等颜色的霉状物；后期霉状物突破心室向果肉扩展，导致果肉腐烂；严重时果肉大部腐烂。果皮外可见不规则的褐色斑块。观察症状标本或照片，注意病果腐烂特点及霉状物颜色等。
2. 病原 由多种弱寄生真菌引起，常见的有alternaria sp.、trichothecium roseurn、fusarium monilifome、penicillium sp.、paceilomyces sp.、cephalosporium sp.等。均属于半知菌亚门丝孢纲真菌。
（八）桃软腐病（rhizopus stolonifer）
1. 症状 主要在采收后发生。初期果实表面产生淡褐色圆形病斑，但病斑扩展迅速，很快使病果呈浅褐色至灰褐色软腐，呈烂泥状。病斑表面产生浓密的初白色、后呈灰白色的棉絮状菌丝团及较稀疏的小黑点状孢子囊。观察症状标本或照片，注意病征特点。
2. 病原 枝根霉。属于接合菌亚门根霉属真菌。
病菌菌丝体无隔，有假根与匍匐菌丝，在与假根相对应处丛生孢囊梗，孢囊梗顶生黑色孢子囊。孢子囊内产生大量孢囊孢子，孢囊孢子无色、单胞、球形。取培养有匍枝根霉的培养皿，置低倍镜下直接观察，注意假根、匍匐菌丝及孢囊梗的自然生长特性。而后挑取少许病菌制片镜检，进一步观察病菌形态特征。
（九）苹果、梨、桃红粉病（trichothecium roseum）
1. 症状 在果实近成熟期及贮藏运输期发生。病斑圆形，呈凹陷腐烂状，烂果肉粉红色，具苦味；病斑表面常产生粉红色霉层，有时霉层略呈轮纹状，严重时全果腐烂。观察症状标本或照片，注意病斑特点、霉层颜色及是否排列成轮纹。
2. 病原 粉红单端孢。属于半知菌亚门单端孢属真菌。
病斑表面的粉红色霉层即为病菌的分生孢子梗与分生孢子。分生孢子梗细长、简单、无色多胞，回缩合轴式产孢；分生孢子卵圆形、无色、双胞、两细胞上大下小不等。从病斑表面或培养菌种上挑取少量病菌制片镜检，观察分生孢子梗及分生孢子形态特点。
（十）苹果锈果病（apple scar skin viroid）
1. 症状 在果实上主要有3种症状类型。
锈果型：从萼洼处开始，向梗洼方向放射出多条锈色斑纹，典型时斑纹为5条，并与心室相对应。斑纹由表皮细胞木栓化所致，形状不甚规则。严重时果面龟裂，果实畸形，果肉僵硬。
花脸型：果实着色后果面散生许多不着色的黄绿色斑块，使果实呈现黄绿相间的“花脸”状。
混合型：果面上既有锈色斑纹，又有着色不均的花脸型，此外，在黄色品种上还可产生许多深绿色凹陷斑点，果面凹凸不平。
观察症状标本或照片，区别不同症状类型的异同点。
2. 病原 苹果斑纹类病毒，简称“assd”。
（十一）板栗种仁斑点病（penicillium sp.etc）
1. 症状 只在贮运期间板栗的种仁上表现症状。在种仁表面形成圆形、近圆形、线形或不规则形的多种类型病斑。病斑颜色从灰色至褐色、黑褐色不同，严重时造成整个种仁腐烂。观察症状标本或照片，注意病斑形状、颜色等特点。
2. 病原 由多种半知菌亚门真菌引起，主要有：penicillium sp.、colletotrichum sp.、fusarium sp.、alternaria sp.等。
五、实习作业：
1. 绘苹果炭疽病，梨黑星病（无性态和有性态），水果青霉病和红粉病，桃软腐病的病原形态简图。
2. 列表比较苹果轮纹病和苹果炭疽病的症状异同点。
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