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果树病害--葡萄、桃、柿、枣主要病害的识别与鉴定
实验实习四 葡萄、桃、柿、枣主要病害的识别与鉴定
一、目的要求 通过症状与病原观察，掌握葡萄、桃、柿、枣主要病害症状特征和病原特点。
二、仪器用品 显微镜、幻灯机、投影机、计算机、载玻片、盖片、解剖刀、拨针、软化液、蒸馏水、擦镜纸、刀片等。
三、实习材料 葡萄、桃、柿、枣主要病害（葡萄：白腐病、霜霉病、黑痘病、穗轴褐枯病、灰霉病、毛毯病、褐斑病；桃：黑星病、瘿螨畸果病、缩叶病、穿孔病；柿：圆斑病、角斑病；枣：锈病，枣疯病）的症状标本、病原标本、切片、挂图、照片、幻灯片、多媒体课件等。
四、观察内容和方法
（一）葡萄白腐病（coniothyrium diplodiella）
1. 症状 可危害果粒、穗轴、果柄、叶片和枝蔓。穗轴、果柄受害，形成褐色水浸状病斑，病皮极易剥离，有土腥味；并可蔓延到果粒上。果粒受害，多从果粒基部开始，产生初为黄色，渐变褐色的病斑，病斑扩大，导致果粒呈淡褐色腐烂，病粒极易脱落；后期从果皮下密生许多灰白色小粒点（分生孢子器），小粒点上并可溢出许多灰白色粘液，使果粒呈“白腐”状；严重时可使整个果穗腐烂；最后病果失水干缩变成猪肝色僵果、不易脱落。叶片受害，多从叶缘开始，病斑较大，外围淡黄褐色，中部褐色。半圆形或近圆形，轮纹状，后期病斑上散生灰黑色小粒点（分生孢子器）。老熟枝蔓发病，病斑暗褐色，稍凹陷，上生灰白色小点（分生孢子器）；后期病斑纵裂，肉质破碎，仅留下维管束，使病皮呈“披麻状”。幼嫩枝蔓发病，病斑灰白色，稍凹陷，上生灰黑色小点（分生孢子器）。观察症状标本，注意各不同部位的受害特点、分生孢子器的颜色等。
2. 病原 白腐盾壳霉。属于半知菌亚门盾壳霉属真菌。
分生孢子器圆形或扁圆形，顶端稍突起，底部壁较厚；分生孢子梗生于器底部，单胞、不分枝、淡褐色；分生孢子单胞、淡褐色至暗褐色、椭圆形或卵圆形、一端稍尖、内含1～2个油球。 取带有灰白色小点的果皮一块，作徒手切片，镜检分生孢子器及分生孢子的形态特点，注意分生孢子梗着生位置、分生孢子内有无油球。
（二）葡萄霜霉病（plasmopara viticola）
1. 症状 主要危害叶片。叶片正面产生褪绿黄斑，背面产生白色霜霉状物。新梢、幼果发病，表面产生白色霜霉状物。观察症状标本，注意霜霉状物的产生位置及颜色。
2. 病原 葡萄生单轴霉。属于鞭毛菌亚门单轴霉属真菌。
白色霜霉状物为病菌的孢囊梗和孢子囊。孢囊梗从气孔中伸出，丛生，单轴直角分枝3~5次；孢子囊无色、卵形至椭圆形，顶端有乳突。卵孢子产生于病组织内部，球形、褐色、表面光滑、略具波纹状起伏。从病叶背面挑取少量白色霜霉状物制片镜检，观察孢囊梗的分枝特点，顶端状况及孢子器形态等。剪一块新鲜的已变黄叶片病斑， 以1％naoh或乳酚油煮沸，使之透明，然后制片镜检。观察卵孢子的颜色、形状、表面特征等。
（三）葡萄黑痘病（sphaceloma ampelium）
1. 症状 主要危害绿色的幼嫩部分。果柄、叶柄、嫩梢、卷须等受害，病斑长条形、梭形或不规则形，中部色浅呈灰、灰褐或灰黑色，边缘色深呈深褐或黑色，且病斑中部常常凹陷、开裂。幼果发病，病斑圆形，中部凹陷呈灰白色，外部深褐色，边缘紫色，整个病斑似“鸟眼”状；潮湿时，病斑上可产生小黑点并溢出灰白色粘液。叶片发病，病斑圆形或不规则形，中央灰白色，边缘暗褐色或紫褐色，后期病斑中央常破碎穿孔。观察症状标本或照片，注意各受害部位的症状异同点及病斑各层颜色。
2. 病原 葡萄痂圆孢，属于半知菌亚门痂圆孢属真菌。
（四）葡萄穗轴褐枯病（alternaria sp.）
1. 症状 主要在花蕾期到幼果期发生，初在穗轴上产生淡褐色水浸状斑点，扩大后为淡褐色至褐色不规则形凹陷的病斑，病斑围绕受害部位一周，则造成其下部组织枯死。观察症状标本或照片，与葡萄白腐病为害穗轴时的症状进行比较。
2. 病原 交链孢霉。属于半知菌亚门链格孢属真菌。
（五）葡萄灰霉病（botrytis cinerea）
1.症状 主要在花蕾期至幼果期发生，有时也可危害近成熟果实。主要症状特点是在各受病部位表面产生鼠灰色霉状物。叶片发病，病斑淡黄褐色、不规则形，边缘常有细轮纹。嫩梢、穗轴、果柄受害，形成淡褐色条斑，严重时形成绕被害部位一周的不规则形淡褐色病斑，病部凹陷。果粒发病，形成淡褐色近圆形腐烂病斑，严重时造成整个果粒的淡褐色腐烂。观察症状标本或照片，注意其症状特点，并与葡萄白腐病（穗轴受害），葡萄穗轴褐枯病进行比较。
2. 病原 灰葡萄孢。属于半知菌亚门葡萄孢属真菌。
（六）葡萄毛毯病（eriophes vitis）
1. 症状 仅危害叶片，初期病斑正面隆起，背面凹陷，凹陷处密生白色长毛状物，呈绒毯状，后期逐渐变成黄、红、红褐色。观察症状标本，注意毛状物的颜色、密度，叶片正面是否隆起，背面是否凹陷？并与葡萄霜霉病（叶片）进行比较。
2. 病原 葡萄锈壁虱。属于微型螨类。
（七）葡萄褐斑病（大褐斑病isariopsis clavispora 、小褐斑病cercospora roesleri）
1. 症状 大褐斑病：病斑近圆形或不规则形，直径3~10 mm，中部黑褐色，边缘红褐色，外围黄褐色，病斑背面可长黑褐色霉层，有时病斑中部有环纹。小褐斑病：病斑多角形或近圆形，直径2~3 mm，深褐色，中部颜色稍浅，后期背面产生较明显的黑色霉状物。观察两种褐斑病症状标本，比较其异同点。
2. 病原 大褐斑病：褐斑拟棒束孢。属于半知菌亚门拟棒束孢属真菌。小褐斑病：座束梗尾孢。属于半知菌亚门尾孢属真菌。
大褐斑病分生孢子梗细长、褐色、多胞，常10～30根集结成束状，孢梗束基部紧密结会在一起，顶部分开；分生孢子倒棍棒状、褐色、多胞、稍弯曲。从大小褐斑病病原标本上刮取少量霉状物制片镜检，观察分生孢子梗与分生孢子形态特征。
（八）桃黑星病（fuscladium carpophilum）
1. 症状 主要危害果实，在果实肩部先产生暗褐色圆形小点，后形成黑色痣状病斑，许多病斑常聚合成片，严重时病部发生龟裂。观察症状标本或照片，注意病斑特点，其颜色是否黑痣状？
2. 病原 核果黑星孢。属于半知菌亚门黑星孢属真菌。
分生孢子梗丛生、暗褐色、多胞、简单、常有弯曲；分生孢子淡褐色、椭圆形至瓜籽形、单胞或双胞。观察病原切片，注意分生孢子梗及分生孢子形态特征。
（九）桃瘿螨畸果病（eriophes catacardiae）
1. 症状 落花后幼果即可表现症状，初期病斑暗绿色、凹陷、不规则形；随桃果增大，病部挑毛逐渐变褐、倒伏、脱落，病斑呈深绿色凹陷；最后导致果实凹凸不平、着色不均、成深绿色的无毛“猴头”果，严重时均果表面常常龟裂。观察症状标本或照片，注意病果凹陷程度、病斑上有无挑毛及挑毛颜色，表面是否开裂等。
2. 病原 下心瘿螨。属于微型螨类。
（十）桃缩叶病（taphrina deformans）
1. 症状 叶片肥厚、皱缩、呈波纹状，渐变红褐色，后期于病叶表面产生一层灰白色粉状物，严重时病叶变褐、焦枯、脱落。观察症状标本，掌握病叶特点。
2. 病原 畸形外囊菌。属于子囊菌亚门外囊菌属真菌。
病部灰白色粉状物即为病菌的子囊与子囊孢子。子囊成层状平行排列于寄主表面，裸露、圆筒形、子囊下有足胞，一般内含4～8个子囊孢子；子囊孢子无色、单胞、近球形至椭圆形，在子囊内外可以芽殖。镜检病菌切片，观察病原形态，注意子囊内子囊孢子的数目。
（十一）桃穿孔病（xanthomonas pruni etc.）
主要有3种：细菌性穿孔病、霉斑穿孔病和褐斑穿孔病
1. 症状 （1）细菌性穿孔病：穿孔边缘不整齐，多在叶脉两侧或叶片边缘发生，病斑紫褐色至黑褐色，外围有黄晕。（2）霉斑穿孔病：穿孔边缘整齐，无坏死残余组织；病斑褐色，湖湿时叶背长污白色霉状物。（3）褐斑穿孔病：穿孔边缘整齐，有明显的坏死残余组织；病斑中部淡褐色，边缘紫色或红褐色，斑上有一明显的环纹，潮湿时病斑上长出灰褐色霉状物。观察3种穿孔病症状标本，比较其症状异同点。
2. 病原 （1）细菌性穿孔病：核果黄单胞杆菌xanthomonas pruni，属于黄单孢杆菌属细菌。（2）霉斑穿孔病：嗜果刀孢 clasterosporium carpophilum，属于半知菌亚门刀孢属真菌。（3）褐斑穿孔病：核果尾孢 cercospora circumscissa，属于半知菌亚门尾孢属真菌。
（十二）柿圆斑病（mycosphaerella nawae）
1. 症状 主要危害叶片，也可危害柿蒂。叶片病斑圆形，中间色浅、呈褐色，边缘色深，呈黑色，外围有黄晕；后期病斑背面产生黑色小点。柿蒂受害，病斑圆形，褐色。观察症状标本，注意病斑形状及颜色。
2. 病原 柿叶球腔菌。 属于子囊菌亚门球腔菌属真菌。
（十三）柿角斑病（cercospora kaki）
1. 症状 主要危害叶片与柿蒂。叶片病斑多角形，叶正面病斑中部浅褐色，边缘及病斑中的叶脉黑色，后期密生许多线球状小黑点；背面病斑褐至黑褐色，边缘不明显，亦可产生小黑点，但量很少。柿蒂发病，多在四个角上，褐色，不规则形，后期正反两面均可产生小黑点，以背面较多。观察症状标本，注意症状特点，比较与柿圆斑病的异同点。
2.病原 柿尾孢。属于半知菌亚门尾孢属真菌。绒球状小黑点即为病菌的子座、分生孢子梗与分生孢子。子座暗褐色、半球形，其上丛生分生孢子梗。分生孢子梗淡褐色、顶生一个分生孢子，分主孢子倒棍棒状、直或稍弯、多胞、无色至淡黄色。从病叶表面刮取绒球状小黑点制片或做徒手切片，镜检观察，注意分生孢子梗着生特点，分生孢子形状、颜色及细胞数目。
（十四）枣锈病（phakopsora zizyphi-vulgaris）
1. 症状 只危害叶片。多在叶片背面脉基部两侧先出现症状，初为淡绿色小点，逐渐形成暗黄色突起（夏孢子堆），后期突起破裂，散出黄褐色粉状物（夏孢子）；叶正面对应处为淡黄色斑点，后期斑点枯死；严重时叶背面产生许多夏孢子堆，并造成早期落叶。观察症状标本，注意夏孢子堆着生特点。
2. 病原 枣层锈菌。属于担子菌亚门层锈菌属真菌。夏孢子黄色、卵圆形至椭圆形，表面密生短刺。从病叶上刮取少量黄褐色粉状物制片镜检，观察夏孢子形态特征。
（十五）枣疯病（mlo）
1. 症状 主要特点为枝叶丛生，叶片黄化，黄化叶片很小，病树结果常造成果实花脸状。观察症状标本，注意症状特点，丛生枝是否开花，叶片大小、颜色等。
2. 病原 植原体（phytoplasma）。
五、作业
1. 每人交一片葡萄白腐病菌的徒手切片。
2. 列表比较葡萄白腐病、灰霉病、穗轴褐枯病在果穗上的症状异同点。
3. 绘葡萄白腐病、葡萄霜霉病（无性、有性）、葡萄褐斑病及枣锈病（夏孢子）病菌形态图。
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