玫瑰愈伤组织的诱导培养

2010/8/24 20:16:08

愈伤组织的诱导Hill(1967)最早报道从杂交茶香月季（hybridtearose）的茎上诱导了愈伤组织，该实验证明在培养基中添加2，4-D或添加NAA和激动素KT均能很快诱导出愈伤组织。随后不同实验以不同品种为试验材料，从叶、叶柄、根、茎、原生质体、合子胚、花药、子房、花瓣、花萼、和花托成功地诱导了愈伤组织。
愈伤组织的成功诱导与品种的基因型有关?摇Lloyd等（1988）曾研究Roseprsica与xanthina，hybrida，Clarissa，Rcabrosa的愈伤发生能力，发现只有Rosepersica与xanthina在MS基本培养基上，添加低浓度的BAP和NAA时，节间能产生愈伤，愈伤组织脆弱，呈淡黄绿色。Kunitake等(1993)研究了RoserugosaThunb，Rosemultiflora，Roseallbacv，SemiplenaRosehybridacv，DuplesRoseharisonii，Rosespinosissi的未成熟种子的愈伤发生能力，发现只有RoserugosaThurb能产生愈伤组织，品种Rontl和Soraya比品种Baccara和Mercedes更易产生愈伤(Kintzios等，1999)。
外植体类型?摇Aren等（1993）详细地调查了RosehybridacvMeirutral不同外植体的愈伤诱导率，发现不同外植体愈伤产生的能力不同，叶为90%，根为70%，节间为55%，花药为19%。
激素激素也是影响愈伤生成的重要因素，Rout等（1991）以Landora为材料，在添加BA和NAA，2，4-D的MS的培养基上，外植体在接种的7～12d后，在近轴面的叶柄和中脉处产生愈伤，愈伤组织诱导频率高达92%。在接种后15～20d，外植体茎切端处产生愈伤，诱导率为76%。生长素种类和浓度对愈伤产生能力的影响同样很大。早期实验多采用NAA结合BAP或BA等，近年来多采用2，4—D，并证明2，4—D是诱导愈伤的必要因素（Kintzios等，1999；Rout等，1996；vanderSalm等，1996；Vises—suwan等，1997）。进一步研究发现2，4-D对愈伤的诱导效果依赖于月季的基因型，如2，4—D浓度从113umol/L增加到181umol/L降低了Rosehybrida栽培种“Care-freeBeauty”的愈伤诱导频率，但该浓度则对另一个品种“GrandGala”无影响。对于“RedSunblaze”而言，当浓度从113umol/L增加到452umol/L，则表现出愈伤的诱导率提高了，随后当2，4—D再增加，则显著地降低愈伤的诱导频率。愈伤组织在诱导愈伤组织的培养基上能得到很好继代培养（subculture、Li等，2002）。VanderSalm等（1996）证明2，4—D对诱导Rosepersica与xanthina和Moneyway产生愈伤是非常必要的，进一步添加低浓度的BA有正效应，但如BA浓度过高，则产生抑制作用。与以上实验结果不同，Kintzios等（1999）则发现2，4—D对愈伤诱导有负影响作用，可能因为采用的外植体是成熟的叶片。
合子胚的发育时期对愈伤的形成能力也有影响?摇如处于心形胚的合子胚，其愈伤诱导率只有2%，子叶胚时的合子胚愈伤诱导率达到85%。

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