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组培法快速繁殖优质草花
创建园林化城市是现代城市园林建设发展的方向，而科学技术的研究、应用在城市园林绿化可持续发展中无疑具有先导作用。植物组织培养技术是将植物体的某一部分器官、组织、细胞等在离体条件下通过人工无菌培养的方式来进行快速繁殖。这项技术目前在很多园林植物上得到了应用，据有关资料统计，植物组织培养技术已渗入到花卉园艺植物的80个科、450多种植物。其应用范围之广，主要是它具有其它繁殖技术无法比拟的优点，如保存脱毒种苗，维持杂交F1代优良性状，生长周期短，全年试验、生产，不受气候影响等。因此世界各国花卉产业都将组培作为一种大规模工厂化生产的手段来应用。近两年，西安市园林研究所承担了市中心钟、鼓楼广场等城市主要街景的节日布置工作，草花需量大增。草花在园林景观中是很重要的绿化材料，它具有品种繁多，色彩丰富，花期错落及可调控、见效快的特点。盆栽草花可以用来装饰会场、厅堂、节日摆放等；露地栽培的草花主要用来布置花坛、花境、花带等；它能与乔、灌木、草坪配合构成园林绿化复层结构，丰富园林景观。但经过两年的观察，我们发现不少品种草花退化严重，达不到应有的美化观赏效果。虽然从国外引进少量优质品种，但价格昂贵，出苗率低，而且多为杂交一代种子，即使收获到种子也极易变异。在这种情况下，运用植物组织培养技术对优良品种进行快速繁殖，既可保持优良品质不变，又可在短期内获得大量种苗的优势也就体现了出来。
西安市园林研究所于80年代中期建立起植物组织培养室，完成了郁金香组织培养技术的课题研究，但由于当时科研政策等因素制约，使该项组培技术未能发挥它应有的社会和生产效益。以后十几年中，由于种种原因，组培的研究应用工作一直处于停滞状态。1998年，由西安市建委立项，委托西安市园林研究所开展“利用植物组织培养技术快速繁殖优良草花品种”的课题研究及应用工作。该课题于1998年4月正式启动，在一年多的时间里，通过课题主持人及参加人员的共同努力，有了阶段性突破。从实验研究顺利过渡到生产阶段，现已有8000成品苗开花，点缀在城市主要街景、小区等处，可为西安市提供2-3万盆组培繁殖的各种草花。我们于1998年9月选定以大花万寿菊、矮牵牛、百日草三种花为组培快速繁殖的对象。万寿菊原产于南美墨西哥等地，为一年生草本植物，喜温暖环境，不耐寒，喜温热，杂交一代大花万寿菊具有花大、色艳、花期长、摆放效果十分壮观，对环境的适应性较强。矮牵牛原产南美州，性喜温暖，不耐霜冻，又不耐30℃以上的高温，株体高度一致，差异微小，摆放效果好，花色鲜艳、优美整齐，但种子出苗率很低，价格昂贵。
以万寿菊为例，其组培繁殖过程如下：
一、植物名称
杂交一代大花万寿菊。金黄色“大头娃”，桔黄色“发现”两个品种。
二、培养途径
1、以叶片或叶柄为外植体，通过脱分化产生愈伤组织，再进行分化产生不定芽，由不定芽生成小苗的方式进行快速繁殖。这种方法继代速度快，经过一次脱分化和再分化的过程，在短期内可获得大量苗子，但经实验观察后用这种方法繁殖植株变异率较高。
2、不经过愈伤组织，而是通过侧芽和顶芽在激素作用下抑制顶端优势，促进侧芽生长，生成小苗进行快速繁殖。经观察这种方法由于生长点侧芽数目有限，速度不如第一种快，但这种方法获得的小苗能保持母本的优良性状，几乎无变异发生。所以，我们选定用这种方法进行快速繁殖。
三、无菌培养的建立
选用幼嫩的带侧芽的茎段或顶芽做培养的外植体，接种前先用自来水冲洗2-3遍，然后用肥皂水洗一遍，再用自来水冲5-10分钟。在无菌条件下，用2%的NaCIO消毒液消毒20分钟，再用无菌水冲洗3-4次。然后将茎段切成1-1.5cm的带有一对侧芽的小段，顶芽切成0.5cm的芽，接种在经高压灭菌的固体MS培养基上(PH5.8-6.0)。置于25℃左右的培养室内，光照时间为12小时，光照强度为300lux。
四、侧芽的诱导和生长
当无菌培养建立以后，便进行侧芽诱导和促其生长繁殖的试验，用30种不同激素的配比经上述试验、记录、观察、比较后进行筛选，确定出适合诱导和生长的培养基，以下列举几个有代表性的不同配比的培养基进行说明:(略)
从上表可以看出，Ⅱ、Ⅲ组，不但侧芽萌动快，而且生长良好，侧芽健壮。经过比较确定了MS+6BA1+NAA0005为最适合的继代培养基，在此培养基上生长，愈伤组织少，侧芽20天至1个月后可以长至4-5cm左右，成为带6-8片叶的健壮无根苗。同时，基部分化的小苗为4-6个，反复利用茎切段，可不断增殖。
五、生根培养
经过筛选，确定MS培养基(不加任何激素)即可以进行壮苗及生根培养。若加少量NAA，虽生根迅速，但易徒长，造成细高苗，不利以后移栽。将上述无根壮苗转MS培养基进行根诱导，一般2-3周即可长出洁白的正常根系，根长到2-3cm即可移栽。若根太长，移苗时易伤根、烂根；若根太短，则影响水份和营养吸收，而不易生长。
六、试管苗出瓶与苗期管理
经过上述几个阶段的培养，小苗已生根成为完整的再生植株，这时便可出瓶移栽。移栽前最好打开瓶塞放在阳光充足，温度接近自然温度的地方锻炼1-2天，然后取出幼苗，用自来水将根部的琼脂冲洗干净，再移栽到合适的基质中。我们选用的基质主要是木屑与园土的混合物。先将苗床用1%托布津消毒，上面铺20cm左右的园土，将园土浇透水，上面再铺10cm左右的木屑土，先不浇水，这时将幼苗移植在木屑土上，操作要小心，勿伤苗，以免引起病害。移植完毕，用喷雾器将表面喷透，然后用塑料薄膜覆盖，保持湿度在90%以上，温度20-30℃，防止太阳直射。一个星期后，可逐步揭开塑料膜，适量浇水，并施以少量稀肥水，以利幼苗迅速生长，增强抵抗力，便于进一步移栽到大田或上盆，一般照此法移栽成活率在80%以上，生长较粗壮的植株成活率可达95%。1999年5月底，经过上述组培繁殖的第一批大花万寿菊开花，花形好，花色鲜艳，保持了原来亲本的的优良性状。今后，我们计划继续就万寿菊、矮牵牛等几个优良品系的草花进行大量组培繁殖，同时将凤梨、红掌等高档盆花进行组培试验及应用生产。
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